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中華人民共和國國家標準 中華人民共和國國家標準
食品中糖精鈉的測定方法 GB 5009.28-85
Method for determination of saccharin sodium in foods
━━━━━━━━━━━━━━━━━戛ォォォォォォォォォォォォォォォォォォォォ
本標準適用于各類食品中糖精鈉的測定。
第一法 薄層色譜定性及半定量測定法
1 原理
在酸性條件下, 食品中的糖精鈉用乙醚提取、濃縮、薄層色譜分離、顯色后，與標準
比較，進行定性和半定量測定。
2 試劑
2.1 10%硫酸銅溶液。
2.2 4%氫氧化鈉溶液。
2.3 6N鹽酸: 取100ml鹽酸, 加水稀釋至200ml。
2.4 乙醚：不含過氧化物。
2.5 無水硫酸鈉。
2.6 無水乙醇及95%乙醇。
2.7 展開劑
2.7.1 苯-乙酸乙酯-36%乙酸(12:7:1)。
2.7.2 三氯甲烷-丙B-甲酸(9:3:0.1)。
2.8 顯色劑
2.8.1 溴甲酚綠-溴酚藍顯色劑:稱取0.1g溴甲酚綠和溴酚藍,加乙醇溶解并稀釋至200ml。
2.8.2 0.04%溴甲酚紫: 50%乙醇溶液, 用0.1N氫氧化鈉調(diào)至pH=8。
2.9 硅膠: GF254。
2.10 聚酰胺粉: 200目。
2.11 糖精鈉標準溶液：精密稱取0.0851g經(jīng)120℃干燥4h后的糖精鈉，加乙醇溶解，移入
100ml容量瓶中，加95%乙醇稀釋至刻度。此溶液每毫升相當于1mg糖精鈉(C6H4CONNaSO2?
2H2O)。
3 儀器
3.1 玻璃紙：生物制品透析袋紙或不含增白劑的市售玻璃紙。
3.2 玻璃噴霧器。
3.3 微量注射器。
3.4 紫外光燈：波長253.7nm。
3.5 薄層板：10×20cm或20×20cm。
3.6 展開槽。
4 操作方法
4.1 樣品提取
4.1.1 飲料、冰棍、汽水：取10ml均勻試樣(如樣品中含有二氧化碳，先加熱除去。如
樣品中含有酒精，加4％氫氧化鈉溶液使其呈堿性，在沸水浴中加熱除去。)置于100ml分
液漏斗中, 加2ml6N鹽酸，用30、20、20ml乙醚提取三次，合并乙醚提取液，用5ml鹽酸酸
化的水洗滌一次，棄去水層。乙醚層通過無水硫酸鈉脫水后，揮發(fā)乙醚，加2.0ml乙醇溶
解殘留渣, 密塞保存，備用。
4.1.2 醬油、果汁、果醬等：稱取20.0g或吸取20.0m1均勻試樣，置于100ml容量瓶中，
加水至約60ml，加20ml 10％硫酸銅溶液，混勻，再加4.4m14％氫氧化鈉溶液，加水至刻
度，混勻。靜置30min。過濾，取50ml濾液置于150ml分液漏斗中，以下按4.1.1自“加2ml
6N鹽酸”起依法操作。
4.1.3 固體果汁粉等：稱取20.0g磨.的均勻試樣，置于200ml容量瓶中，加100ml水，加
溫使溶解、放冷。以下按4.1.2自“加20ml10％硫酸銅溶液"起依法操作。
4.1.4 糕點、餅干等蛋白、脂肪、淀粉多的食品：稱取25.0g均勻試樣，置于透析用玻璃
紙中，放入大小適當?shù)臒瓋?nèi)，加50ml 0.02N氫氧化鈉溶液，調(diào)成糊狀,將玻璃紙口扎緊,
放入盛有200ml 0.02N氫氧化鈉溶液的燒杯中，蓋上表面皿，透析過夜。
量取125ml透析液(相當12.5g樣品),加約0.4ml 6N鹽酸使成中性，加20ml 10％硫酸銅
溶液，混勻，再加4.4ml4％氫氧化鈉溶液，混勻,靜置30min,過濾。取120ml濾液(相當10g
樣品)，置于250ml分液漏斗中，以下按4.1.1自“加2ml 6N鹽酸”起依法操作。
4.2 薄層板的制備
4.2.1 硅膠GF 254薄層板: 稱取2g硅膠GF 254，加水調(diào)成糊狀，涂成0.25～0.30mm厚的
10×20cm或20×20cm的薄層板，稍干后，于110℃活化1h，取出后置于干燥器內(nèi)備用。
4.2.2 聚酰胺薄層板：稱取1.6g聚酰胺,加0.4g可溶性淀粉，加約15ml水，研磨3～5min,
立即涂成0.25～0.30mm厚的10×20cm的薄層板，室溫干燥后，在80℃下干燥1h。置于
干燥器中保存。
4.3 點樣
在薄層板下端2cm處，用微量注射器點10μl和20μl的樣液二個點，同時點3.0、5.0、
7.0、10.0μl糖精鈉標準溶液，各點間距1.5cm。
4.4 展開與顯色
將點好的薄層板放入盛有展開劑(2.7.1或2.7.2)的展開槽中，展開劑液層約0.5cm,并
預先已達到飽和狀態(tài)。展開至10cm,取出薄層板,揮干,硅膠GF254板可在紫外光燈下觀察。
如噴溴甲酚-溴酚藍顯色劑，先將板在90±5℃干燥箱放10～15min。斑點顯黃色至藍綠
色。如用聚酰胺板，按GB 5009.29-85《食品中山梨酸、苯甲酸的測定方法》操作。根據(jù)
樣品點和標準點的比移值進行定性，根據(jù)斑點大小進行半定量測定。
4.5 計算
A1 × 1000
X1 = ────────────..............(1)
m1 × V2/V1 × 1000
式中：X1─―樣品中糖精鈉的含量，g/kg或g/l;
A1─―測定用樣液中糖精鈉的含量，mg;
m1─―樣品質(zhì)量(體積)，g(ml)；
V1──樣品提取液殘留物加入乙醇的體積，ml;
V2─―點板液體積，ml。
第二法 紫外分光光度法
5 原理
在酸性條件下，食品中的糖精鈉用乙醚提取，經(jīng)薄層分離，溶于碳酸氫鈉溶液中，于
波長 270nm處測吸光度。與標準比較，定量。
6 試劑
6.1 2％碳酸氫鈉溶液。
6.2 糖精鈉標準溶液:精密稱取0.0851g經(jīng)120℃干燥4h后的糖精鈉,置于100ml容量瓶中,
加2%碳酸氫鈉溶解,并稀釋至刻度。此溶液每毫升相當于1mg糖精鈉(C6H4CONNaSO2?2H2O)。
6.3 其他試劑同第2章。
7 儀器
7.1 分光光度計。
7.2 其他儀器同第3章。
8 操作方法
8.1 樣品提取
同4.1。
8.2 薄層板的制備
同4.2。
8.3 點樣
在薄層板的下端2cm處中間，用微量注射器點樣, 將200～400μl樣液點成一橫條狀，
條的右端1.5cm處，點10μl糖精鈉標準溶液(2.11)，使成一小圓點。
8.4 展開
將點好的薄層板按4.4展開,在紫外光燈下觀察,將薄層板上樣品中糖精鈉的條狀斑,連
同硅膠GF 254或聚酰胺刮入小燒杯中，同時刮一塊和樣品條狀大小相同的空白薄層板置于
另一燒杯中做對照用。刮下的含糖精鈉的吸附劑與對照吸附劑各加5.0ml 2％碳酸氫鈉溶
液，50℃加熱助溶，移入10ml離心管中，離心分離(3000r/min)20min，取上清液備用。
8.5 標準曲線制備
吸取0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml糖精鈉標準溶液(6.2),分別置于100ml容量瓶
中,各加2%碳酸氫鈉溶液至刻度混勻(每毫升分別相當0、0.020、0.040、0.060、0.080、
0.10mg糖精鈉)于波長270nm測吸光度，繪制標準曲線。
8.6 測定
將樣品離心液、試劑空白液，于波長270nm分別測吸光度，與標準比較。
8.7 計算
(A2-A3)
X2 = ──────────× V5...................(2)
m2 × V4/V3
式中：X2──樣品中糖精鈉的含量,g/kg或g/L；
A2――測定用樣品溶液中糖精鈉含量，mg/ml；
A3―─空白溶液中相當糖精鈉含量，mg/ml;
V5――溶解刮下糖精鈉時所用2％碳酸氫鈉溶液體積，ml;
m2──樣品質(zhì)量(體積)，g(ml);
V3――樣品殘留物加入乙醇的體積，ml;
V4─―點樣用樣品乙醇溶液的體積，ml。
注:本方法可同時測定苯甲酸。樣品提取、點板(在板上點10μl0.1mg/ml苯甲酸標準
溶液)、展開等測定方法均同糖精鈉的測定。紫外分光光度法定量時,從薄層板刮
下的苯甲酸斑點，溶于10.0ml2％碳酸氫鈉溶液中，取5.0ml置于50ml容量瓶中，
加1ml6N鹽酸，搖勻,加水稀釋至刻度，于波長230nm測吸光度。
標準曲線制備：取0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml苯甲酸標準溶液(0.1mg/ml)
分別置于100ml容量瓶中，加2％碳酸氫鈉溶液至10ml，加1ml6N鹽酸溶液，振搖，
加水稀釋至刻度，同樣品溶液測定。
第三法 酚磺酞比色法
9 原理
在酸性條件下，樣品中的糖精鈉用乙醚提取分離后與酚和硫酸在175℃作用，生成的
酚磺酞與氫氧化鈉反應產(chǎn)生紅色溶液，與標準系列比較定量。
10 試劑
10.1 苯酚：取無色結(jié)晶苯酚配成1:1(W/W)硫酸溶液。
10.2 20％氫氧化鈉溶液。
10.3 堿性氧化鋁：層析用。
10.4 液體石蠟：作油浴用。
10.5 其他試劑同2.1～2.5。
11 儀器
11.1 油浴：175±2℃。
11.2 分光光度計。
11.3 層析柱。
12 操作方法
12.1 提取:
同4.1。
12.2 測定
取一定量(含糖精鈉0.2～0.6mg)的樣品乙醚提取液，置于蒸發(fā)器中，于水上慢慢將
乙醚蒸發(fā)至約10ml，轉(zhuǎn)入100ml比色管或100ml錐形瓶中,將乙醚揮發(fā)至干,然后置于100℃
干燥箱中20min,取出，加入5.0ml苯酚-硫酸溶液，旋轉(zhuǎn)至苯酚―硫酸與管壁充分接觸，于
175±2℃的油浴或干燥箱中加熱2h(溫度達到175℃時記時間)，取出后放冷,小心加20ml水,
振搖均勻，再加10ml20％氫氧化鈉溶液，加水至100ml，混勻。然后通過5.0g堿性氧化鋁
柱層并接收流出液，用1cm比色杯以乙醚空白管為零管，于波長558nm測吸光度。
12.3 標準曲線的制備
精密稱取未風化的糖精鈉0.1000g，加20ml水溶解后轉(zhuǎn)入125ml分液漏斗中，并用10ml
水洗滌容器, 洗液轉(zhuǎn)入分液漏斗中, 加6N鹽酸使呈強酸性，用30、20、20ml乙醚分三次振
搖提取，每次振搖2min。將三次乙醚提取液均經(jīng)同一濾紙上裝有10g無水硫酸鈉的漏斗脫
水濾入100ml容量瓶中，用少量乙醚洗滌濾器, 洗液并入容量瓶中并稀釋至刻度，混勻。
此溶液每毫升相當于1mg糖精鈉。
取上述乙醚標準溶液0.2、0.4、0.6、0.8ml，分別置于100ml比色管中或100ml錐形瓶
中，將乙醚在水浴上蒸干。
另取50ml乙醚，分次置于100ml比色管中或100ml錐形瓶中，在水浴上緩緩蒸發(fā)至干。
將標準管與乙醚空白管，置于100℃干燥箱中20min，以下按12.2自“取出加入5.0ml
苯酚-硫酸溶液”起依法操作，繪制標準曲線。
12.4 計算
A4-A5×1000
X3 = ─────────── ....................(3)
m3×V7/V8×1000
式中：X3──樣品中糖精鈉含量，g/kg或g/l;
A4――測定用溶液中糖精鈉量，mg;
A5──空白溶液中糖精鈉量，mg;
m3──樣品質(zhì)量或體積，g或ml;
V6──樣品乙醚提取液總體積，ml;
V7──比色用樣品乙醚提取液體積，ml。
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附加說明：
本標準由全國衛(wèi)生標準技術(shù)委員會食品衛(wèi)生標準分委員會提出，由衛(wèi)生部食品衛(wèi)生監(jiān)
督檢驗所歸口。
本標準第一法由遼寧省衛(wèi)生防疫站、衛(wèi)生部食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗所負責起草。
本標準第二法由天津市衛(wèi)生防疫站負責起草。
本標準第三法由遼寧省衛(wèi)生防疫站負責起草。
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中華人民共和國衛(wèi)生部1985-05-16發(fā)布 1985-12-01實施
標準法規(guī)
食品中糖精鈉的測定方法
電話：0791-83670605
傳真：0791-83670606
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